Практическая работа

Опыт № 1: Количественное определение мочевой кислоты в сыворотке крови.

Принцип метода. Мочевая кислота восстанавливает фосфорновольфрамовый реактив с образованием соединения голубого цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации мочевой кислоты в анализируемом образце.

Воспроизводимость: коэффициент вариации – не более 5%.

Техника выполнения.

Реагенты

Контроль

Калибровочная проба

Опыт

 Образец (сыворотка)

2 мл

 Калибровочный раствор мочевой кислоты

2 мл

 Вода дистиллированная

2 мл

Раствор карбоната натрия

1 мл

1 мл

1 мл

Фосфорновольфрамовый реактив

0,5 мл

0,5 мл

0,5 мл

Содержимое пробирок тщательно перемешать, инкубировать при комнатной температуре (+18–25° С) в течение 30 минут, после чего измерить величину оптической плотности калибровочной и опытных проб против контрольной пробы при 640 нм (590–700 нм, красный светофильтр) в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм. Окраска устойчива в течение 30 минут.

Расчет: С = Аопк × 30 × 10,

где 30 мкмоль – содержание мочевой кислоты в калибровочном растворе, 10 – пересчет на разбавление сыворотки.

В норме содержание мочевой кислоты:   мужчины – 240–500 мкМ               женщины – 160–400 мкМ


Last modified: Thursday, 19 January 2017, 4:32 PM