Практическая работа

Опыт № 1: Гидролиз дезоксирибонуклеопротеинов (ДНП) дрожжей и обнаружение компонентов ДНП в гидролизате.

Дрожжевые клетки богаты нуклеопротеидами. Проводят кислотный гидролиз дрожжей и ниженазванными реакциями определяют продукты гидролиза.

Техника выполнения. В широкую пробирку с воздушным холодильником поместить 1 лопаточку сухих дрожжей и добавить 10 мл 10% раствора Н2SO4. Поставить пробирку в кипящую водяную баню на 1 час. После гидролиза пробирку охладить и проделать с гидролизатом дрожжей качественные реакции на составные части ДНП.

Качественные реакции на составные части ДНП:

(1) Биуретовая реакция на полипептиды (белок). К 5 каплям гидролизата добавляют 10–12 капель 10 % раствора едкого натра и 2 капли 1 % раствора сульфата меди, появляется розовая или розово-фиолетовая окраска.

(2) Серебряная проба на пуриновые основания (демонстративный опыт). К 10 каплям гидролизата добавляют 10 капель раствора аммиака до щелочной реакции, затем 20 капель 2 % аммиачного раствора нитрата серебра. При стоянии через 3–5 мин. образуется светло-коричневый осадок серебряных солей пуриновых оснований.

(3) Качественная реакция на пентозу (реакция Троммера). К 10 каплям используемой жидкости прибавляют 10 капель 10 % раствора едкого натра и 5 капель 7 % раствора сульфата меди. Осторожно нагреть верхнюю часть содержимого пробирки до закипания и кипятить ровно 1 мин. Появится красное окрашивание.

(4) Молибденовая проба на фосфорную кислоту. К 10 каплям гидролизата приливают 20 капель молибденового реактива и кипятят. При этом жидкость окрашивается в лимонно-желтый цвет. Пробирку охлаждают в струе холодной воды. На дне пробирки появляется кристаллический лимонно-желтый осадок фосфорномолибденовокислого аммония.

В выводе написать схему гидролиза ДНП.

Last modified: Friday, 20 January 2017, 2:11 PM